维生素C检测试剂盒(碘量滴定法)
产品货号:BA
产品规格:25T
产品简介:
维生素C(VitaminC)又称L-抗坏血酸,是高等灵长类动物与其他少数生物的必需营养素。在生物体内,维生素C是一种抗氧化剂,为酸性己糖衍生物,是稀醇式己糖酸内酯,保护身体免于自由基的威胁,同时也是一种辅酶,其广泛的食物来源为各类新鲜蔬果。Vc有L-型和D-型两种异构体,只有L-型的才具有生理功能,还原型和氧化型都有生理活性。
维生素C检测试剂盒(碘量滴定法)检测原理是铜盐与过量的碘盐形成碘化铜,而碘化铜不稳定,分解为碘化亚铜和游离碘,其释放出来的游离碘能够氧化维生素C形成碘化氢,直到维生素C完全被碘氧化为止,剩余的微量碘与KI指示剂形成蓝色。该法终点明确,简单快速,可准确测量维生素C的含量,其误差一般小于2%。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
产品组成:
需自备的仪器和用品:
组织捣碎器、滤纸及漏斗、锥形瓶、蒸馏水、微量碱式滴定管。
操作步骤(仅供参考):
1.配制组织匀浆液:提前半天或1天取适量容器,加入1瓶MPA、ml5×MPAbuffer以及ml蒸馏水充分混匀,获得组织匀浆液。4℃保存待用,2周有效。注意:组织匀浆液也低温保存时有可能出现结晶或析出,可温浴溶解。
2.配制KI滴定工作液:取适量的KI滴定液,按KI滴定液:蒸馏水=3:5的比例配制KI滴定工作液,充分混匀。如果维生素C样品提取液中维生素C含量小于1mg时,无需配制工作液,直接用KI滴定液进行滴定。
3.制备维生素C样品提取液:食品:清洗干净新鲜蔬菜或水果,用布或吸水纸吸干表面水分或自然晾干。称取20-50g,加入50-80ml组织匀浆液,置于组织捣碎器中打成浆状,滤纸过滤,滤渣可用少量组织匀浆液清洗1-2次,合并滤液备用,其总体积不超过ml。注射液:取0.1ml注射液用9.9ml组织匀浆液稀释。药品片剂:精确称量一片药品的重量,用组织匀浆液稀释,ml容量瓶定容,混匀过滤。
4.维生素C样品滴定:准确吸取一定体积的上述提取液(如5ml)置于ml的锥形瓶内,加入10mlKI滴定工作液或KI滴定液,加入数滴微KI指示剂,混匀,然后用Cu标准液进行滴定,边滴定边摇动,直至呈现蓝色,即为滴定终点,记录滴定量。另取相同量的组织匀浆液作为空白对照滴定。
计算:
维生素C含量(mg/份)=(V样-V空)×C
式中:V样=滴定样品所消耗的Cu标准液(0.01M)毫升数(ml);
V空=滴定空白对照所消耗Cu标准液(0.01M)的毫升数(ml);
C=0.88=1mlCu标准液(0.01M)相当于0.88mgVitaminC。
注意事项:
1.某些水果、蔬菜浆状物泡沫太多,可滴加数滴丁醇或辛醇等。
2.如果提取物中含有较多色素,滴定时不易看出颜色变化,可用白陶土脱色或加入1ml氯仿。
3.如果浆状物不易过滤,可低速离心,留取上清液进行滴定。
4.配制好的组织匀浆液应严格4℃密闭保存,2周有效。注意:组织匀浆液也低温保存时有可能出现结晶或析出,可温浴溶解。
5.待测样本如不能及时测定,应置于2~8℃保存,3天内稳定。
6.如果样品浓度过高,应用蒸馏水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。
有效期:12个月有效。
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