维生素E检测试剂盒（可见分光光度法）
产品货号：BA
产品规格：50管/24样
产品简介：
维生素E（VitaminE）是一种天然脂溶性抗氧化剂，能阻断机体不饱和脂肪酸的过氧化，维持不饱和脂肪酸细胞膜的完整性和正常功能，并可清除超氧阴离子自由基，具有延缓衰老、预防溶血性贫血等作用，在医药、化妆品、保健品、食品行业具有较高的应用价值。
VE还原Fe3+为Fe2+，Fe2+与1,10-菲罗啉产生有色络合物，在nm有特征吸收峰。
技术指标：
最低检出限：3.μg/mL
线性范围：3.-50μg/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
产品组成：
溶液的配制：
1.试剂一：自备无水乙醇，常温保存。
2.试剂二：自备正庚烷，常温保存。
3.试剂五贮备液的制备：将试剂五的粉剂溶于2mL无水乙醇配制成贮备液，4℃避光保存待用。
4.试剂五应用液的制备：取试剂五贮备液用无水乙醇20倍稀释后使用，建议当天配制当天使用。
5.标准品：临用前加入1mL试剂三，配成20mg/mL的标准品溶液。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、天平、台式离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、漩涡震荡仪、无水乙醇、正庚烷、蒸馏水和EP管。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
1.组织样本
注意：吸取上层正庚烷抽提液时，切勿将中间无水乙醇与水的液相层吸入。
2.血清（血浆）样本
注意：离心后，吸取上层正庚烷抽提液时，切勿将中间无水乙醇与水的液相层吸入。
二、测定步骤
1.分光光度计预热30min以上，调节波长至nm，无水乙醇调零。
2.标准溶液的制备：将20mg/mL标准液用试剂三稀释为50、25、12.5、6.25、3.g/mL的标准溶液备用。
3.操作表：（在1.5mL离心管中依次加入下列试剂）
三、维生素E含量计算
1.标准曲线的绘制：
以各个标准溶液的浓度为x轴，其对应的ΔA标准为y轴，绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将ΔA带入方程得到x（μg/mL）。
2.维生素E含量的计算：
（1）按样本质量计算
VE含量（μg/g质量）=x×4×V样总÷W=2x÷W
（2）按血清（血浆）体积计算
VE含量（μg/mL）=x×4×V样总÷V血清（浆）=10x
4：待测样本为L的正庚烷抽提液加L的无水乙醇，相当于将抽提样本稀释4倍后检测；V样总：提取过程加入正庚烷的体积，0.5mL；W：样本质量，g；V血清（浆）：提取过程中加入血清（浆）体积，0.2mL。
注意事项：
1.离心后，在吸取上层正庚烷抽提液时，切勿将中间无水乙醇与水的液相层吸入，以免影响试验结果。
2.如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
3.若反应体系产生沉淀，建议将待测样本用试剂三进行适当的稀释，并在计算公式中乘以稀释倍数。
4.检测过程中，比色皿需用无水乙醇冲洗，勿用蒸馏水以防出现分层影响试验数据。
5.显色结束后尽快完成测定。
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